精品免费久久I色图综合I午夜影院久久久I国产天堂av电影I欧美 日韩 国产 成人I日韩一二三级I亚洲国产精品视频I久操免费在线视频Iav私库I黄色亚洲精品I操白虎逼I美女扒开内裤让男人捅I五月av在线Its女装人妖调教另类刺激I噼里啪啦免费看I欧洲亚洲另类I欧美日韩四区I精品国产一级I蜜桃视频一区I欧美裸体精品I亚洲免费在线视频观看I日韩成人福利视频I一本色道久久88综合日韩精品I欧美毛片在线观看I色哟哟avIwww婷婷

當前位置:網站首頁技術文章 > 怎么從 -80℃ 凍存的抗凝全血中提取RNA

怎么從 -80℃ 凍存的抗凝全血中提取RNA

更新時間:2020-07-01 點擊量:2777

實驗材料:
-80℃ 冷凍 75 天的抗凝全血;預先按 500 µl 血樣比 1 ml Buffer L9 的比例加入 Buffer L9 的同一個抗凝全血樣本作為對照組(備注:Simgen 全血總 RNA 試劑盒中的 Buffer L9 與抗凝全血預混后可在-20℃ 長期凍存,RNA 不會降解)。

實驗試劑:
全血總 RNA 試劑盒(simgen,Cat.No.5201050)、
cDNA 鏈合成試劑盒(simgen,Cat.No.7306025)、
2×SYBR Green PCR Mix(simgen,Cat.No.7106100)、
人 β-actin 引物(Forward TGACGTGGACATCCGCAAAG
/Reverse:  CTGGAAGGTGGACAGCGAGG)

實驗方法:
1. 分兩組進行對比實驗,每組各做兩管:第fist組取 2 個 2 ml 離心管,各加入 500 µl 新鮮全血,編號 1、2;第二組加入 500 µl 新鮮全血后再加入 1 ml Buffer L9,混合均勻,編號 3、4。將兩組樣本置于 -80℃ 凍存,凍存 75 天。
2. 75 天后取出后置于室溫,待血樣全部融化后,向 1、2 中加入 1 ml Buffer L9 混合均勻;
3. 13000 rpm 離心 10 分鐘;
4. 吸取 700 µl 離心上清轉移到裝有 500 μl 無水乙醇的 1.5 ml 離心管中,混勻;
5. 分兩次將混合液轉移到核酸純化柱中,離心去濾液;
6. 依次用 500 µl Buffer WA 和 700 µl Buffer WBR 各洗滌一次;
7. 用 50 µl RNase-Free Water 洗脫 RNA;
8. 在微量紫外分光光度計上測量 RNA 的濃度;
9. 瓊脂糖凝膠電泳;
10.逆轉錄制備 cDNA;
11.取 5 μl cDNA 模板進行 RT-PCR 檢測。

公司為廣大客戶提供高質量的免疫學和生命科學相關產品。質量可靠,被全國各大院校科研機構認可并為Elisa試劑盒標準品對照品長期供應商。我們將以專業執著,精益求精的精神服務于廣大科研用戶。

主站蜘蛛池模板: 瑞金市| 哈尔滨市| 交口县| 罗甸县| 南康市| 通许县| 丰城市| 巴彦淖尔市| 宁明县| 青阳县| 晴隆县| 九江县| 五台县| 东阳市| 湘潭市| 比如县| 和平区| 武清区| 五华县| 竹北市| 拉孜县| 固阳县| 平和县| 西林县| 根河市| 西充县| 临汾市| 襄垣县| 乌拉特后旗| 浠水县| 彰武县| 喀什市| 图木舒克市| 石阡县| 乐山市| 吉水县| 拜泉县| 什邡市| 师宗县| 色达县| 台中市|